由中國認(rèn)證認(rèn)可協(xié)會(huì)檢測分會(huì)、天津分析測試協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與檢測技術(shù)分會(huì)、天津阿爾塔科技有限公司與我要測網(wǎng)聯(lián)合主辦的“阿爾塔有約-精彩演繹 實(shí)力綻放”食品安全在線系列研討會(huì)，于6月21日圓滿舉辦第二期。會(huì)后，參與網(wǎng)友提出若干問題。阿爾塔科技將網(wǎng)友問題進(jìn)行了篩選和整合，并與專家及時(shí)溝通。

現(xiàn)將問答內(nèi)容集中呈現(xiàn)。

一、中國工程院院士，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院院長沈建忠問題答疑

1、硝基呋喃類和瘦肉精類現(xiàn)在有QUECHERS法嗎？

回答：硝基呋喃類代謝物和β-受體激動(dòng)劑類藥物的樣品前處理方法要求比較高，現(xiàn)在方法已經(jīng)很成熟，在標(biāo)準(zhǔn)方法中都是應(yīng)用經(jīng)典方法，在文獻(xiàn)報(bào)道中有QuEChERS的方法。

2、目前在獸藥檢測技術(shù)上還有那些要改進(jìn)的地方？

回答：主要還是樣品前處理方法需要突破，實(shí)現(xiàn)多類獸藥的高通量測定。

3、標(biāo)準(zhǔn)中對同一種獸藥經(jīng)常使用不同標(biāo)記的內(nèi)標(biāo)，是什么原因？

回答：只要是穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)標(biāo)，效果是一樣的，可能的原因是價(jià)格和來源。

4、獸殘測定質(zhì)控樣品制備的關(guān)鍵點(diǎn)和難點(diǎn)是什么？

回答：質(zhì)控樣品制備首先要獲得空白樣品，然后設(shè)計(jì)好陽性添加樣品的濃度，最好能夠同時(shí)包括試劑空白樣品。

5、獸殘多殘留測定國標(biāo)方法預(yù)計(jì)什么時(shí)候出來？

回答：2021年頒布的36項(xiàng)獸藥殘留國標(biāo)中有四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類的多殘留方法，多類藥物的篩選方法正在制定，估計(jì)近幾年會(huì)有結(jié)果。

6、哪些場景下用小型質(zhì)譜儀比較合適？

回答：現(xiàn)場檢測需要用到小型質(zhì)譜儀，但是目前還沒有已經(jīng)市場化同時(shí)性能指標(biāo)優(yōu)秀的小型質(zhì)譜儀。

7、為什么一定用乙腈提??？可以用甲醇，乙醇等低毒性溶劑提取獸藥分子嗎？

回答：獸藥的提取溶劑選擇多樣，可以用有機(jī)溶劑（甲醇、乙腈等），也可以用緩沖液等極性溶劑。

8、德國一個(gè)實(shí)驗(yàn)室使用SCIEX液質(zhì)（低分辨質(zhì)譜）做出來了五百多種生物毒素同時(shí)測定，有相關(guān)配套標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)嗎？

回答：多類獸藥檢測的篩選方法已有標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)。

9、高分辨質(zhì)譜x500r跟普通三重四級桿有哪些優(yōu)勢？

回答：高分辨TOF與三重四極桿是兩種類型的儀器，分別側(cè)重于精確質(zhì)量的全掃描篩查和準(zhǔn)確定量的靶向檢測。

10、獸藥殘留檢測樣本前處理的難點(diǎn)在哪里？

回答：現(xiàn)階段多類獸藥殘留檢測的難點(diǎn)在于不同類獸藥的理化性質(zhì)差異較大，在提取和凈化步驟中難以兼顧；另外有些種類的獸藥需要檢測蛋白結(jié)合狀態(tài)的藥物或代謝物，也會(huì)增加多類獸藥同時(shí)檢測的難度。

二、天津阿爾塔科技公司創(chuàng)始人、董事長、首席科學(xué)家 張磊博士問題答疑

1、溶解性質(zhì)不同的獸殘?jiān)谂渲茦?biāo)液的過程中的注意事項(xiàng)。

回答：溶解性是配制標(biāo)液時(shí)要考慮的問題之一，其次還要保證組分的穩(wěn)定性、檢測方法等眾多因素。將不同的組分配制成混標(biāo)時(shí)還要考慮這些組分是否能溶解到同一種溶劑中等因素。

2、穩(wěn)定同位素標(biāo)準(zhǔn)品是否可以定制？

回答：可以。阿爾塔目前可提供的農(nóng)藥、獸藥、醫(yī)藥、食品、環(huán)境、臨床等穩(wěn)定同位素標(biāo)記內(nèi)標(biāo)物1700余種，常用的農(nóng)獸藥內(nèi)標(biāo)物都實(shí)現(xiàn)了國產(chǎn)化或在研發(fā)計(jì)劃中，您可以先咨詢我們的銷售人員您需要的產(chǎn)品是否已經(jīng)在庫存目錄中，如果沒有的話原則上可以定制。

3、未來獸殘檢測領(lǐng)域，穩(wěn)定同位素標(biāo)記產(chǎn)品所占比重趨勢如何？

回答：我認(rèn)為趨勢是增加的。

4、未來的質(zhì)譜檢測中，哪些目標(biāo)物合成具有優(yōu)勢？

回答：這個(gè)問題很難有統(tǒng)一的答案，我認(rèn)為只要有檢測需要的化合物就有合成的需要。

5、貴公司當(dāng)前的獸藥標(biāo)記產(chǎn)品中，自研產(chǎn)品比重如何？將來的投入規(guī)劃？

回答：常用的獸藥內(nèi)標(biāo)基本上都是自研的，更多標(biāo)記產(chǎn)品的研發(fā)將根據(jù)市場需求確定，我們的目標(biāo)是讓客戶從"有什么用什么"轉(zhuǎn)變?yōu)?quot;想用什么有什么"、"沒什么做什么"。

6、呋喃它酮-D5，標(biāo)液經(jīng)過衍生化前處理，跟樣品中的對比，有時(shí)候峰型，響應(yīng)不太好。排除流動(dòng)相問題，請教可能是前處理哪個(gè)環(huán)節(jié)的原因？

回答：我揣測您想問的可能是呋喃它酮代謝物-D5（AMOZ-D5）的衍生化，因?yàn)檫秽?D5本身不需要進(jìn)行衍生化。峰型不好可能是檢測方法的問題；響應(yīng)不好可能有以下幾個(gè)方面的原因，或者是質(zhì)譜條件不合適造成質(zhì)譜響應(yīng)低，或者衍生化反應(yīng)不完全造成衍生化產(chǎn)物濃度低，或者衍生化產(chǎn)物損失較大沒有完全回收。在您的實(shí)驗(yàn)中究竟是什么原因需要一步一步的仔細(xì)排查，在沒有詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)記錄和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的情況下我也很難判斷。如果您用的是阿爾塔的產(chǎn)品，可以與我們的技術(shù)支持人員溝通。

7、氘代和C同位素替代那個(gè)更有優(yōu)勢？

回答：各有優(yōu)勢，氘代的價(jià)格更低，碳13標(biāo)記的穩(wěn)定性更好一些，根據(jù)具體應(yīng)用選擇吧。

8、獸藥標(biāo)記產(chǎn)品的研制難點(diǎn)和壁壘都有哪些？

回答：每一種獸藥內(nèi)標(biāo)都要單獨(dú)合成，難點(diǎn)各不相同。

9、在磺胺類測定方面有哪些創(chuàng)新點(diǎn)值得去深挖研究？

回答：我們聚焦在純品、單標(biāo)和混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液的研究，也研究與產(chǎn)品對應(yīng)的檢測方法，對基體中磺胺類化合物的檢測未作深入探索。我認(rèn)為與其他農(nóng)獸藥相同，磺胺類化合物的檢測不應(yīng)只看母體，還應(yīng)考慮不同代謝途徑產(chǎn)生的代謝物，準(zhǔn)確定量可能還需要對應(yīng)的同位素標(biāo)記內(nèi)標(biāo)。

10、13C,18O,15N的原材料是否還很貴重，目前這些原材料是否主要掌握在國外公司？

回答：碳-13的原料目前仍由國外提供，氧-18和氮-15的應(yīng)該有國產(chǎn)化的，不清楚價(jià)格是否比進(jìn)口的有優(yōu)勢。

11、穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)的優(yōu)勢？

回答：穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)用于同位素稀釋法對目標(biāo)物進(jìn)行準(zhǔn)確定量，減少基質(zhì)效應(yīng)對檢測的干擾。

三、中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所孫雷研究員問題答疑

1、《食品安全法》實(shí)施以后，獸藥殘留檢測的標(biāo)準(zhǔn)以GB形式發(fā)布的較少，以前的GB/T、農(nóng)業(yè)部等標(biāo)準(zhǔn)是否可以采納？

回答：《食品安全法》實(shí)施以后，獸殘檢測方法標(biāo)準(zhǔn)以GB形式發(fā)布的目前已經(jīng)有74個(gè)，之前以GB/T、農(nóng)業(yè)部公告等形式發(fā)布的方法標(biāo)準(zhǔn)仍然有效，仍然可以采納。

2、GB開頭的標(biāo)準(zhǔn)色譜條件，前處理過程是否允許偏離？

回答：殘留檢測方法標(biāo)準(zhǔn)在實(shí)驗(yàn)室使用之前，一般是要根據(jù)自身儀器設(shè)備的配備情況進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，轉(zhuǎn)化成本實(shí)驗(yàn)室的SOP，然后根據(jù)SOP進(jìn)行樣品檢測的。標(biāo)準(zhǔn)中的儀器條件，包括色譜條件和質(zhì)譜條件一般都是參考條件，可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室儀器進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。前處理過程中不是關(guān)鍵步驟，在經(jīng)過數(shù)據(jù)考察在不影響檢測結(jié)果的情況下，也是可以適當(dāng)調(diào)整的。

3、很多獸藥有葡萄糖苷代謝物形式存在，建立方法時(shí)無法判定酶解效果。如果有基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，是不是更可靠？

回答：有些獸藥在動(dòng)物體內(nèi)代謝時(shí)會(huì)發(fā)生葡萄糖醛苷或硫酸芳基II相軛合反應(yīng)，檢測時(shí)需要通過酶解將結(jié)合態(tài)釋放為游離態(tài)，酶解前后藥物含量差異大小需要借助藥物飼喂動(dòng)物后得到的活體動(dòng)物樣品檢測得到，如果基質(zhì)標(biāo)物是通過飼喂動(dòng)物得到，是可以使用的。

4、目前，想申請參與獸藥殘留檢測方法標(biāo)準(zhǔn)的研制工作，是什么樣的流程？怎么申請？

回答：想申請參與獸殘檢測方法標(biāo)準(zhǔn)的研制工作，首先要根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室工作內(nèi)容和已有工作基礎(chǔ)，找到農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制定和修訂項(xiàng)目指南中適合的項(xiàng)目，向全國獸藥殘留專家委員會(huì)辦公室提交項(xiàng)目申報(bào)書，包括項(xiàng)目實(shí)施方案。

5、非靶向檢測方法能成為國標(biāo)嗎？

回答：多種類藥物的非靶向殘留檢測方法，在通過對方法靈敏度、線性、準(zhǔn)確度和精密度等一系列技術(shù)參數(shù)進(jìn)行考察后，如果滿足法規(guī)要求，是可以成為國標(biāo)的，目前該類方法在肉、蛋、奶中開發(fā)的較多，肝臟、腎臟中較少。

6、獸藥殘留檢測方法標(biāo)準(zhǔn)研制過程中一般需要考察哪些技術(shù)參數(shù)？

回答：獸殘檢測方法標(biāo)準(zhǔn)研制過程中一般需要進(jìn)行方法靈敏度（定量限）、線性、回收率和精密度等技術(shù)參數(shù)考察，看是否滿足法規(guī)要求。

7、在進(jìn)行樣品中獸藥殘留檢測前，怎么選擇方法標(biāo)準(zhǔn)？

回答：選用檢測方法標(biāo)準(zhǔn)主要看方法的適用范圍，看是否包括所檢測樣品種類，然后看方法性能，如方法的靈敏度是否滿足要求，前處理過程是否簡便等。

8、肉蛋奶等動(dòng)物性食品中獸藥殘留檢測結(jié)果是否合格，怎么判定？

回答：動(dòng)物性食品中獸藥殘留檢測結(jié)果判定分為兩種情況：如果是禁用藥物、停用藥物或不得檢出的藥物，要根據(jù)藥物的判定限或方法定量限進(jìn)行判定；如果藥物是允許使用但有最大殘留限量規(guī)定，要依據(jù)最大殘留限量進(jìn)行判定。

9、同一化合物存在多個(gè)國標(biāo)，其檢測結(jié)果如果不一致，怎么處理。同理，如果化合物既有單殘留也有多殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)，定量如何協(xié)調(diào)？

回答：多個(gè)檢測方法檢測同一化合物，理論上檢測結(jié)果應(yīng)該差別不大。要結(jié)合下達(dá)任務(wù)時(shí)推薦的方法標(biāo)準(zhǔn)以及本實(shí)驗(yàn)室的已批準(zhǔn)參數(shù)方法而定。

10、國標(biāo)中食品安全檢測標(biāo)準(zhǔn)中的質(zhì)譜離子對（一般在標(biāo)準(zhǔn)中的資料性附錄中），是否容許偏離？

回答：獸藥殘留檢測方法標(biāo)準(zhǔn)中的定性定量離子對和儀器條件一樣，也是參考條件。要參考方法標(biāo)準(zhǔn)中的離子對，結(jié)合自身實(shí)驗(yàn)室儀器配備情況選用響應(yīng)值較強(qiáng)的離子對即可。

四、SCIEX中國首席應(yīng)用專家李立軍問題答疑

1、SCIEX串聯(lián)四級桿定量的方案適合于所有系列的型號嗎？

回答：適合于3500-7500純串聯(lián)四級桿及QTRAP，個(gè)別型號僅需要微調(diào)一些參數(shù)。

2、高分辨篩查方法是否所有QTOF類儀器都可以用？

回答：所有QTOF儀器均可以參考，但因?yàn)镾CIEX的QTOF速度足夠快，可以一針進(jìn)樣同時(shí)采集到所有待篩查的化合物的二級質(zhì)譜，其他型號的儀器可能需要兩針進(jìn)樣才行。

3、在QTRAP里，金剛烷胺干擾物質(zhì)怎么排除和區(qū)分？

回答：金剛烷胺有干擾具體要看數(shù)據(jù)才能分析，是兩對MRM均有，還是只有一對，保留時(shí)間是否穩(wěn)定，還是基線噪音高等。